Il-mikroskopija tal-fluworexxenza irrevoluzzjonat il-ħila tagħna li nħarsu u nistudjaw kampjuni bijoloġiċi, u ppermettilna nidħlu fid-dinja kkomplikata taċ-ċelloli u l-molekuli. Komponent ewlieni tal-mikroskopija fluworexxenti huwa s-sors tad-dawl użat biex jeċita molekuli fluworexxenti fil-kampjun. Matul is-snin, ġew impjegati diversi sorsi tad-dawl, kull wieħed bil-karatteristiċi u l-vantaġġi uniċi tiegħu.
1. Lampa tal-Merkurju
Il-lampa tal-merkurju bi pressjoni għolja, li tvarja minn 50 sa 200 watt, hija mibnija bl-użu tal-ħġieġ tal-kwarz u għandha forma sferika. Fiha ċertu ammont ta 'merkurju ġewwa. Meta topera, isseħħ skarigu bejn żewġ elettrodi, li jikkawża l-evaporazzjoni tal-merkurju, u l-pressjoni interna fl-isfera tiżdied malajr. Dan il-proċess tipikament jieħu madwar 5 sa 15-il minuta.
L-emissjoni tal-lampa tal-merkurju bi pressjoni għolja tirriżulta mid-diżintegrazzjoni u t-tnaqqis tal-molekuli tal-merkurju waqt il-ħruġ tal-elettrodu, li jwassal għall-emissjoni ta 'fotoni tad-dawl.
Jarmi dawl qawwi ultravjola u blu-vjola, li jagħmilha adattata għal diversi materjali fluworexxenti eċċitanti, u huwa għalhekk li tintuża ħafna fil-mikroskopija fluworexxenti.
2. Lampi tal-Ksenon
Sors ieħor ta 'dawl abjad użat komunement fil-mikroskopija tal-fluworexxenza huwa l-lampa tal-kseno. Lampi tal-ksenon, bħal lampi tal-merkurju, jipprovdu spettru wiesa 'ta' wavelengths mill-ultravjola għal qrib infra-aħmar. Madankollu, huma differenti fl-ispettri ta 'eċċitazzjoni tagħhom.
Il-bozoz tal-merkurju jikkonċentraw l-emissjoni tagħhom fir-reġjuni kważi ultravjola, blu u ħodor, li jiżgura l-ġenerazzjoni ta 'sinjali fluworexxenti qawwi iżda jiġi b'fototossiċità qawwija. Konsegwentement, lampi HBO huma tipikament riżervati għal kampjuni fissi jew immaġini ta 'fluworexxenza dgħajfa. B'kuntrast, is-sorsi tal-bozoz tal-kseno għandhom profil ta 'eċitazzjoni aktar lixx, li jippermetti paraguni ta' intensità f'tul ta 'mewġ differenti. Din il-karatteristika hija vantaġġuża għal applikazzjonijiet bħall-kejl tal-konċentrazzjoni tal-jone tal-kalċju. Il-bozoz tal-ksenon juru wkoll eċċitazzjoni qawwija fil-medda tal-infra-aħmar qrib, partikolarment madwar 800-1000 nm.
Il-bozoz XBO għandhom il-vantaġġi li ġejjin fuq il-lampi HBO:
① Intensità spettrali aktar uniformi
② Intensità spettrali aktar b'saħħitha fir-reġjuni infra-aħmar u nofs l-infra-aħmar
③ Produzzjoni ta 'enerġija akbar, li tagħmilha aktar faċli biex tintlaħaq l-apertura tal-objettiv.
3. LEDs
F'dawn l-aħħar snin, ħareġ konkorrent ġdid fl-isfera tas-sorsi tad-dawl tal-mikroskopija tal-fluworexxenza: LEDs. L-LEDs joffru l-vantaġġ li jinxtegħlu u jintfew malajr f'millisekondi, inaqqsu l-ħinijiet ta 'espożizzjoni tal-kampjuni u jestendu l-ħajja ta' kampjuni delikati. Barra minn hekk, id-dawl LED juri tħassir rapidu u preċiż, li jnaqqas b'mod sinifikanti l-fototossiċità waqt esperimenti ta 'ċelloli ħajjin fit-tul.
Meta mqabbla ma 'sorsi ta' dawl abjad, LEDs tipikament jarmu fi spettru ta 'eċċitazzjoni idjaq. Madankollu, meded LED multipli huma disponibbli, li jippermettu applikazzjonijiet versatili ta 'fluworexxenza b'ħafna kuluri, li jagħmlu l-LEDs għażla dejjem aktar popolari f'setups moderni tal-mikroskopija tal-fluworexxenza.
4. Lejżers Sors tad-Dawl
Is-sorsi tad-dawl tal-lejżer huma monokromatiċi u direzzjonali ħafna, u jagħmluhom ideali għal mikroskopija b'riżoluzzjoni għolja, inklużi tekniki ta 'super-riżoluzzjoni bħal STED (Tnaqqis ta' Emissjoni Stimulata) u PALM (Mikroskopija ta 'Lokalizzazzjoni Fotoattivata). Id-dawl tal-lejżer huwa tipikament magħżul biex jaqbel mal-wavelength ta 'eċċitazzjoni speċifiku meħtieġ għall-fluworofor fil-mira, li jipprovdi selettività għolja u preċiżjoni fl-eċitazzjoni tal-fluworexxenza.
L-għażla ta 'sors tad-dawl tal-mikroskopju fluworexxenti tiddependi fuq ir-rekwiżiti sperimentali speċifiċi u l-karatteristiċi tal-kampjun. Jekk jogħġbok tħossok liberu li tikkuntattjana jekk għandek bżonn xi għajnuna
Ħin tal-post: Settembru-13-2023